General-Creșterea dependentă de doză a canabidiolului indusă de calciu intracelular și apoptoză în condrocitele articulare umane
Abstract
Cannabidiolul (CBD) este cel mai abundent compus non-psihoactiv din extracte de Cannabis sativa.
S-a demonstrat că canabinoizii prezintă
- efecte antiinflamatorii,
- analgezice,
- antioxidante,
- neuroprotectoare și
- antitumorigene.
În studiul de față, am investigat efectele CBD asupra condrocitelor articulare umane.
Viabilitatea celulară a fost determinată prin teste Resazurin.
Apoptoza a fost analizată prin colorare anexin-V / 7-actinomicină D (7-AAD) urmată de citometrie în flux.
Activitatea Caspase 3/7 a fost măsurată cu teste caspase. Ca 2+ intracelular ([Ca 2+ ] i) a fost monitorizată prin imagistica cu fluorescență time-lapse.
Pentru măsurarea potențialului membranei celulare a fost utilizată tehnica perforată cu celule întregi perforate. Fosforilarea Erk1 / 2 a fost evaluată prin analiza Western blot. Linia celulară de condrocite C28 / I2 și condrocitele primare au arătat o viabilitate redusă după tratament cu concentrații de CBD mai mari de 4 µM.
Acest efect apoptotic a fost însoțit de o creștere a activității caspazei 3/7 și o creștere a populației timpurii de celule apoptotice. CBD a crescut [Ca 2+ ] i , care a fost însoțit de depolarizarea potențialului membranei celulare.
Creșterea [Ca 2+ ] i a fost abrogată, când Ca 2+ a fost omis din soluția de baie, indicând un aflux de Ca extracelular2+ . Antagonistul receptorului cannabinoid 1 (CB1) AM251 a inhibat influxul de Ca 2+ declanșat de CBD.
Preincubarea cu AM251 a redus efectele toxice ale CBD.
Căutând mediatori ai efectului apoptotic CBD în aval de receptorul CB1, fosforilarea Erk1 / 2 îmbunătățită ar putea fi detectată după tratamentul cu CBD.
Cu toate acestea, această activare Erk1 / 2 sa dovedit a fi neafectată de blocarea receptorilor CB1.
Prezentul studiu demonstrează că CBD
- · promovează apoptoza și creșterea [Ca 2+ ] i în condrocitele articulare umane prin intermediul unui mecanism mediat de receptorul CB1.
© 2019 Autorii. Journal of Orthopedic Research ® publicat de Wiley Periodicals, Inc. în numele Orthopedic Research Society J Orthop Res 37: 2540-2549, 2019.
Martina Winklmayr 1 2, Martin Gaisberger 1 2 3, Michael Kittl 1, Julia Fuchs 1 3, Markus Ritter 1 2 3, Martin Jakab 1
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31378964/- Vezi grafice si tabele din articolul original
Fig 1: Cannabidiolul (CBD) reduce viabilitatea și induce apoptoza în condrocitele umane. Viabilitatea relativă a celulelor C28 / I2 (A) sau a condrocitelor primare umane (B) tratate cu 3-30 µM CBD timp de 2 și 24 de ore. Rezultatele sunt date ca% din controalele netratate (UTC). Media ± deviația standard (SD) a trei experimente independente cu 7-hidroxi-3H-fenoxazin-3-unu-10-oxid sare de sodiu (Resazurin). (C) Analiza prin citometrie în flux a colorării anexin-V / 7-actinomicină D (7-AAD) în celulele C28 / I2 tratate ± CBD. (D) Activitatea Caspase 3/7 (% din UTC) a celulelor C28 / I2 tratate cu concentrații în creștere de CBD. Media ± SD a trei experimente independente. (E) Imagini microscopice ale celulelor C28 / I2 netratate, înfometate sau înfometate și tratate cu 10 sau 30 uM CBD timp de 2 ore.
……???……….
