Diabet -Efectele neuroprotectoare și de conservare a barierei hemato-retiniene ale canabidiolului în diabetul experimental
Abstract
Retinopatia diabetică se caracterizează prin descompunerea barierei hemato-retiniene (BRB) și neurotoxicitate.
Aceste patologii au fost asociate cu stresul oxidativ și citokinele proinflamatorii, care pot funcționa prin activarea lor în aval p38 MAP kinază.
În studiul de față, efectele protectoare ale unui canabinoid nonpsihotrop, canabidiolul (CBD), au fost examinate la șobolanii diabetici induși de streptozotocină după 1, 2 sau 4 săptămâni.
Moartea celulelor retiniene a fost determinată prin testul de marcare terminală a terminalului dUTP; Funcția BRB prin cuantificarea extravazării serului de albumină-fluoresceină din bovine; și stresul oxidativ prin analize ale peroxidării lipidelor, fluorescenței diclorofluoresceinei și nitrării tirozinei.
Diabetul experimental a indus
- · creșteri semnificative ale stresului oxidativ,
- · moartea celulelor neuronale retiniene și
- · permeabilitatea vasculară.
Aceste efecte au fost asociate cu niveluri crescute de factor de necroză tumorală-alfa, factor de creștere endotelial vascular și molecula-1 de adeziune intercelulară și activarea kinazei MAP p38, după cum a fost evaluat prin testul imunosorbent legat de enzime, imunohistochimie și / sau Western blot.
Tratamentul cu CBD
- · a redus semnificativ stresul oxidativ;
- · scăderea nivelului factorului de necroză tumorală-alfa, al factorului de creștere endotelial vascular și al moleculei de adeziune intercelulară-1;
- · și a prevenit moartea celulelor retiniene și hiperpermeabilitatea vasculară în retina diabetică.
În concordanță cu aceste efecte, tratamentul cu CBD
- · a inhibat în mod semnificativ p38 MAP kinaza în retina diabetică.
Concluzii:
Aceste rezultate demonstrează că tratamentul cu CBD
· reduce neurotoxicitatea, inflamația și defalcarea BRB la animalele diabetice prin activități care pot implica inhibarea p38 MAP kinazei. factorul de creștere endotelial vascular și molecula de adeziune intercelulară-1 și activarea kinazei MAP p38, astfel cum a fost evaluată prin testul imunosorbent enzimatic, imunohistochimie și / sau Western blot.
Azza B El-Remessy 1, Mohamed Al-Shabrawey , Yousuf Khalifa , Nai-Tse Tsai , Ruth B Caldwell , Grigorie I Liou
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16400026/- A se studia tabele si grafice din art. Original
fig 2: Efectul neuroprotector al retinei CBD în diabetul experimental. A: Numeroase celule marcate cu TUNEL HRP (săgeți) au fost detectate în retine montate întregi de la șobolani diabetici de 4 săptămâni în comparație cu martorii netratați și grupul tratat cu CBD. B: Numărul total de celule TUNEL HRP-pozitive numărate în fiecare retină, exprimat la 0,5 cm2. Șobolanii diabetici au avut semnificativ mai multe celule TUNEL HRP-pozitive decât martorii și grupul tratat cu CBD (* P <0,001; n = 5 până la 6). Tratamentul cu CBD (10 mg / kg la fiecare 2 zile) a blocat moartea celulelor la nivelul retinelor diabetice, dar nu a modificat numărul de celule TUNEL + la șobolanii martor. C: O imagine reprezentativă arată etichetarea TUNEL a secțiunilor oculare înghețate de la șobolanii diabetici (4 săptămâni) în diferite straturi retiniene; stratul de celule ganglionare (GCL), stratul interior plexiform (IPL), stratul nuclear interior (INL) și stratul nuclear exterior (ONL). Celulele TUNEL + (săgeți) au fost distribuite în principal în straturile retiniene interioare. Măriri originale, × 100 (A).
Fig 3: CBD reduce stresul oxidativ și nitrativ la retinele diabetice. A: CBD reduce peroxidarea lipidelor în retina șobolanilor diabetici. Peroxidarea lipidelor a fost determinată de cantitatea de MDA formată în retina șobolanului. Tratamentul șobolanilor diabetici cu CBD (10 mg / kg la fiecare 2 zile) a inhibat formarea MDA în timp ce tratamentul martorilor nu a afectat formarea MDA. Datele prezentate reprezintă media ± SEM a șase sau șapte animale din fiecare grup. (* P <0,05). B: CBD reduce peroxizii din retina șobolanilor diabetici, reprezentat de fluorescența DCF în retina șobolanului. O imagine reprezentativă arată distribuția fluorescenței în diferite straturi retiniene; stratul de celule ganglionare (GCL), stratul nuclear interior (INL) și stratul nuclear exterior (ONL), stratul segmentului exterior (OSL). C: Analiza morfometrică a intensității fluorescenței în secțiunile seriale ale ochilor șobolanilor arată că șobolanii diabetici au avut o creștere semnificativă a fluorescenței în comparație cu martorii. Tratamentul cu CBD (10 mg / kg la fiecare 2 zile) a inhibat formarea ROS la șobolanii diabetici, dar nu și la controalele normale. Datele prezentate sunt media ± SEM a șase sau șapte animale din fiecare grup (* P <0,05). D: CBD reduce nitrotirozina din retina șobolanilor diabetici. O imagine reprezentativă arată distribuția fluorescenței în diferite straturi retiniene; stratul de celule ganglionare (GCL), stratul interior plexiform (IPL), stratul nuclear interior (INL), stratul nuclear exterior (ONL) și epiteliul pigmentar retinal (RPE). E: Analiza morfometrică a intensității fluorescenței în secțiunile seriale ale ochilor șobolanilor arată că șobolanii diabetici au avut o creștere semnificativă a fluorescenței în comparație cu martorii. Tratamentul cu CBD (10 mg / kg la fiecare 2 zile) a inhibat formarea de nitrotirozine la șobolanii diabetici, dar nu și la controalele normale. Datele prezentate sunt media ± SEM a șase sau șapte animale din fiecare grup (* P <0,05). Măriri originale, × 200.
Fig 8: Figura schematică care rezumă concluziile studiului actual care arată că diabetul experimental determină creșteri atât ale stresului oxidativ, cât și ale mediatorilor inflamatori care duc la activarea kinazei P38 MAP, creșterea permeabilității vasculare și moartea celulelor neuronale.
